诱导性基因打靶原理
诱导性基因打靶技术的核心构造是Cre-LoxP系统,它由重组酶Cre和LoxP位点两部分组成。链接Cre是诱导源码诱导一种能够引发特定DNA序列改变的酶,包括删除、定位定位插入、链接源码熊武总重复、诱导源码诱导倒位和易位等基因突变或染色体变异。定位定位其工作原理是链接通过控制Cre酶的活性,通常通过启动子的诱导源码诱导激活或表达的可诱导性来实现。
这种打靶技术的定位定位关键在于利用诱导系统。通过给予特定的链接诱导剂,可以调控Cre酶的诱导源码诱导表达时间和表达强度。这种时间上的定位定位控制,结合Cre基因定位表达系统的链接宿主细胞特异性,使得在LoxP动物的特定发育阶段和组织细胞中,我们可以精准地定位并操作特定的基因,实现遗传修饰的目的。这种方法在基因工程和遗传学研究中具有重要的应用价值。
纯系养成——单倍体诱导技术(一)
揭示单倍体诱导的新版大富豪源码秘密:育种进程的加速器 在现代农业中,杂种优势是提升农作物生产力的关键,但自交后易丧失这种优势,且成本高昂。这时,单倍体育种技术,尤其是通过单倍体加倍育成DH系(Double Haploid,纯系),成为了缩短育种周期的利器。与转基因技术并驾齐驱,单倍体诱导技术如DHB(Double Haploid Breeding)正在重新定义育种效率。 单倍体的生产方法多种多样,包括组织培养,尽管有突变风险,但它是基础。而CENH3介导和诱导系杂交,特别是后者,作为单倍体诱导的核心技术,正在科学家们的密切关注下不断优化。Stock6玉米品系,简单网页php源码以其能诱导高比例单倍体的能力,成为研究焦点,尽管其机制尚未完全揭示。 MTL基因的突变,由Syngenta团队在年的突破揭示,它与雄配子细胞质的调控密切相关。例如,2G基因的恢复子代生育性,以及通过基因编辑得到的MTLTAL-FS,展示了单倍体诱导如何在杂交过程中产生显著差异。中国农大团队的发现同样引人注目,他们通过CRISPR/Cas9技术,定位到ZmPLA1基因,其突变能直接诱导单倍体,而PLAs序列的保守特性可能影响生育潜能。 法国里昂大学的研究深入到NLD基因,它在雄花穗表达的qhir1区域起作用,单倍体形成受其影响。近期内,红娘相亲平台源码多个研究团队的密集发表,表明单倍体诱导领域的竞争激烈。先正达从年起就开始寻找相关基因,直至年取得关键突破。十年磨一剑,年的TALEN验证和年Nature的成果,见证了这一领域的快速发展。 中国农大团队在年揭示了ZmDMP基因突变对HIR(Haploid Induction Rate,单倍体诱导率)的贡献,他们独立发现ZmDMP基因对单倍体诱导的驱动作用,并通过基因编辑进行验证。这一发现揭示了单倍体诱导机制,进一步提升了DH育种的效率。ZmDMP的突变影响了HIR,其在花粉发育后期的质膜定位,为理解单倍体诱导提供了关键线索。 不止玉米,单倍体诱导在其他作物中也有广泛的应用。水稻-MTL的ai制图源码泄露研究发现,TL突变能诱导单倍体种子,为杂交育种提供了新思路。中国农科院通过基因编辑OsMTL等基因,实现了杂交水稻杂合性状的固定,减少了繁琐的额外杂交步骤。小麦-PLA的研究同样取得进展,陈绍江团队通过突变TaPLA,成功诱导出单倍体,为小麦育种增添了新手段。 拟南芥-DMP的研究虽然未在文中详述,但绍江和刘晨旭团队在Nature Plants上发表的成果,通过编辑DMP8和DMP9,成功在双子叶植物中实现单倍体诱导,进一步拓宽了技术的应用领域。中国农科院林浩团队在豆科植物蒺藜苜蓿上的DMP基因编辑研究,首次将这种技术应用于豆科,展示了其广泛的可能性。 这些研究不仅揭示了单倍体诱导背后的基因奥秘,还推动了农作物纯系创制和性状改良的新途径。未来,随着基因编辑技术的不断进步,我们期待更多创新性的单倍体诱导技术在育种领域大放异彩。参考资料:
1. Coe, Jr. ()
2. Dong X, Xu X, Miao J, et al. ()
3. Gilles LM, Khaled A, Laffaire JB, et al. ()
4. Jacquier NMA, Gilles LM, Pyott DE, et al. ()
5. Kelliher T, Starr D, Richbourg L, et al. ()
6. Liu et al., : Haploid induction in maize (Theor Appl Genet :-)
7. Liu et al., : ZmPLA1 mutation for haploid induction in maize (Mol Plant :-2)
8. Liu et al., a: Haploid induction in wheat (Plant Biotechnol J :-8)
9. Liu et al., b: Efficient wheat haploid induction (J Exp Bot :-)
. Prigge et al., : Maize maternal haploid induction (Genetics :-)
. Wang et al., : Hybrid rice cloning (Nat Biotechnol :-6)
. Wang et al., : Medicago haploid induction (Plant Biotechnol J)
. Yao et al., : Indica rice haploid formation (Nat Plants 4:-3)
. Zhong et al., : Arabidopsis maternal haploid induction (Nat Plants 6:-)
. Zhong et al., : ZmDMP mutation for maize haploid induction (Nat Plants 5:-)
诱导性Cre,给基因敲除装个“开关”
在我们的最新公开课程中,老师们的讨论焦点集中在小鼠实验的条件性敲除上,尤其是关于Tamoxifen诱导的时间特异性问题。我们今天就来深入探讨基因敲除的时空调控策略。 条件性基因敲除小鼠,即loxp位点嵌套的flox小鼠,通过与特定的Cre工具鼠交配,能实现基因在特定空间和时间的精确控制。Cre工具鼠依赖于其启动子表达谱的不同,可在特定组织或细胞中激活,从而控制基因敲除的定位。 为了实现时间上的调控,研究人员引入了诱导性Cre-loxP系统,通过给予诱导剂如四环素、干扰素或雌激素来调控基因敲除的时间窗口。这里有几种诱导型Cre的形式:启动子激活型,如四环素诱导的TetO-Cre,通过rtTA或tTA与TRE元件结合,通过四环素的开关控制Cre表达。
配体诱导型,如雌激素诱导的Cre-ER,利用外源雌激素(如Tamoxifen)控制基因重组。
TetO-Cre系统需多种转基因小鼠配合,通过调控四环素剂量控制Cre在特定组织的表达。Mx1-Cre则依赖干扰素诱导,适用于发育阶段的基因敲除。而Cre-ER系统,尤其是Cre-ERT2,因其操作简便,是目前最常用的诱导型Cre,可通过Tamoxifen实现时间特异的基因敲除。 南模生物作为专业模式生物服务公司,提供各种组织特异性CreERT2小鼠,并提供定制化服务。如需动物模型的开发、饲养或分析咨询,欢迎联系我们的服务热线或邮件地址。 电话:-- 邮箱:tech@modelorg.com 或者关注微信公众号获取更多资讯。广åç诱导åè½ä¸»è¦ä½ç°å¨
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小白也能看懂的科普:芯片漏电定位方法
芯片漏电是失效分析中的常见问题,定位漏电位置是查明失效原因的关键。液晶漏电定位、EMMI(CCD\InGaAs)、激光诱导等方法是工程人员常用的手段。在我国半导体产业中,存在一个误区,即认为激光诱导手段就是OBIRCH。下面,我们为大家科普一下激光诱导(laser scan Microscope)的相关知识。目前,行业内普遍采用的激光诱导方法有三种,它们分别是日本OBIRCH、美国TIVA和新加坡VBA,每种方法都申请了专利。许多人认为只有OBIRCH才是激光诱导,但实际上,TIVA和VBA与OBIRCH是同等级的技术。这三种技术都是在芯片表面进行激光扫描,侦测出阻抗有较明显变化的位置,该位置可能是漏电位置。侦测阻抗变化是通过电压和电流来实现的。以下是三种技术的原理:
1. OBIRCH和TIVA:
如上图所示,这是一个器件的漏电回路,R1代表漏电点的阻抗,I1代表回路电流,V代表回路上的电压。OBIRCH技术是在器件回路加上电压V,然后让激光在芯片表面进行扫描,同时监测回路电流I1的变化。TIVA技术是在器件回路加上微小电流I1,然后让激光在芯片表面进行扫描,同时监测回路电压V的变化。
2. VBA技术:
如上图所示,这是一个器件的漏电回路,R1代表漏电点的阻抗,I1代表回路电流,V1代表回路上的电压,R2是串联在回路中的一个负载,V2是R2两端的电压。OBIRCH技术是在器件回路加上电压V1,然后让激光在芯片表面进行扫描,同时监测V2的变化(V2/R2=I1,实际上也是监测I1的变化)。由此可见,VBA技术实际上就是OBIRCH,只是合理回避了NEC专利。
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